棉花SUPERMAN类锌指蛋白基因GZFP的启动子及功能分析
棉花学报CottonScience2011,23(6):483~489
研究与进展
棉花SUPERMAN类锌指蛋白基因GZFP的
启动子及功能分析
杨郁文1,周建武2,张保龙1*,范晓慧1,任永哲1,陈天子1
(1.江苏省农业科学院农业生物技术研究所/江苏省农业生物学重点实验室,江苏南京210014;2.扬州大学生物科学与技术学院,江苏扬州225009)
摘要:GZFP是来源于陆地棉的一个SUPERMAN类锌指蛋白基因。为了进一步了解该基因功能,本研究通过染色体步移(Genomewalking)获得其启动子区域,并构建该片段与GUS连接的重组载体pBI-pGZFP-5::GUS,通过花浸染法转化拟南芥。转基因植株的GUS染色结果表明GUS基因主要在根部以及花器官表达,而叶片中的表达量很低,并且根部的表达量在整个生育期都很强。通过半定量RT-PCR分析不同诱导下GZFP基因的表达变化,发现ABA、干旱、盐胁迫诱导可以提高其表达量。构建GZFP过量表达载体并通过叶盘法转化烟草,烟草转化株的表型无明显变化,但是转化株中NtOPBP1和NtERD10的表达量较未转化株明显增强,而这两个基因都参与了植物的抗逆反应,说明GZFP基因可能与植物抗逆相关。关键词:锌指蛋白;陆地棉;启动子;抗逆中图分类号:S562.035.3
文献标志码:A
文章编号:1002-7807(2011)06-0483-07
FunctionalAnalysisoftheSUPERMAN-likeZincFingerProteinGeneGZFPandItsPromoter
YANGYu-wen1,ZHOUJian-wu2,ZHANGBao-long1*,FANXiao-hui1,RENYong-zhe1,CHENTian-zi1
(1.InstituteofAgrobiologyGeneticsandPhysiology,JiangsuAcademyofAgriculturalSciences,Nanjing,Jiangsu210014,Chi-
na;2.CollegeofBioscienceandBiotechnology,YangzhouUniversity,Yangzhou,Jiangsu225009,China)
Abstract:GZFP,derivedfromGossypiumhirsutumL,belongstotheSUPERMAN-likezincfingerprotein.TofurtheranalyzethefunctionofGZFP,thepromoterregionofGZFPwasobtainedbygenomewalking.TherecombinationvectorpBI-pGZFP-5::GUScontainingthepromoterwasconstructedandtransformedtoArabidopsisbyAgrobacterium-mediatedmethod.GUSstaining
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域,是属于C2H2型锌指蛋白中的单锌指蛋白。这这类基因的生物功能具有多样性。如矮牵牛的
类锌指蛋白基因的表达量都很低,并且在不同物PhSUP1,玉米的ramosa1,拟南芥的SUPERMAN,种中的同源性也很低,说明它们是一类重要的转
RBE,KNU等,参与调控花器官的发育;LIF调控
收稿日期:2011-05-24
作者简介:杨郁文(1979-),女,硕士,ywyang92@;*通讯作者,zhbl2248@
基金项目:转基因生物新品种培育重大专项(2009ZX08005-003B);江苏省自主创新项目(2009ZX08005-003B)
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