摘要：目的：建立HPLC同时测定杭菊叶中5种绿原酸类成分及木犀草苷的方法，并分析不同生长过程杭菊叶中绿原酸类和黄酮类成分的动态变化，比较同期采收的杭菊叶与杭菊花中成分的差异，为杭菊叶的质量控制、合理利用提供参考。方法：采摘不同生长时期的杭菊叶样品及盛花期的杭菊花样品，采用HPLC方法对杭菊叶及杭菊花中绿原酸类及黄酮类成分进行检测。结果：不同生长时期杭菊叶中绿原酸类及木犀草苷成分呈不同的规律。新绿原酸、隐绿原酸、异绿原酸B随着生长时间而逐渐累积，到9月含量达到峰值后逐步下降；绿原酸、异绿原酸A则随着成分累积，在9月达到峰值，下降后又在11月出现次峰值。木犀草苷则随着生长过程逐步增加，到11月达到含量峰值。同期采收的杭菊叶中绿原酸类及黄酮类成分高于杭菊花。结论：该研究结果为确定杭菊叶的采收时间及质量测定标准提供了参考和依据，为揭示杭菊叶生长过程中资源性化学成分的变化以及药材品质的控制奠定了一定基础。
关键词：杭菊叶； 绿原酸； 黄酮； 生长过程； 动态变化；
杭白菊又称杭菊，是菊科植物Chrysanthemum morifoliumRamat.的干燥头状花序，具有散风清热，平肝明目、清热解毒功效[1],是着名的浙江道地药材“浙八味”之一。杭菊在采收的同时，会产生大量的茎、叶，并且产量比菊花大的多，这些茎、叶往往被视作副产品丢弃，而菊叶具有清肝明目、解毒消肿等功效，可用于头风、目眩、疔疮、痈肿等证[2],具有一定的药用价值。杭菊叶中尚含有大量有机酸、黄酮等成分，其中绿原酸类成分含量较高，包括单咖啡酰基奎宁酸：绿原酸（3-O-咖啡酰基奎宁酸）、新绿原酸（5-O-咖啡酰基奎宁酸）、隐绿原酸（4-O-咖啡酰基奎宁酸），二咖啡酰基奎宁酸：异绿原酸A（3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸）、异绿原酸B（3,4-O-二咖啡酰基奎宁酸）、异绿原酸C（4,5-O-二咖啡酰基奎宁酸），具有抗诱变、抗菌、抗病毒、清除自由基、抗氧化、降血压血脂等多种生物活性[3,4].
杭菊为浙江道地药材，主产于桐乡等地，杭菊叶资源丰富，为了合理开发和综合利用杭菊叶，本文建立了HPLC同时测定菊叶中新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、异绿原酸A、异绿原酸B、木犀草苷的方法；分析了杭菊叶不同生长过程中绿原酸类成分与木犀草苷的变化趋势；并比较了同期采收的杭菊叶与杭菊花中绿原酸类成分与木犀草苷的含量差异，以期为确定杭菊叶的采收时间、质量控制、资源综合利用提供科学依据。
1 材料
1.1 仪器
Thermo U3000型高效液相色谱仪，1/10万电子天平（Sartorius R200D）；B3200S-T超声机（必能信超声有限公司）；Simplicity 纯水仪（ 美国密理博公司） .
1.2 试药
新绿原酸（15012821）、绿原酸（14111207）、隐绿原酸（15020603）、异绿原酸A（13041309）、异绿原酸B（15042210）、木犀草苷（13100904）购自成都普瑞法科技开发有限公司，其纯度均≥98%.
甲醇（色谱纯140405）购于天津四友，水为超纯水（自制），甲醇、磷酸均为分析纯。
杭菊叶及杭菊花样品采自金华职业技术学院百草园，经金华职业技术学院医学院罗国海副教授鉴定为菊科植物Chrysanthemum morifoliumRamat.的干燥头状花序和叶。采收后的杭菊叶采用自然干燥方法干燥，杭菊花采用蒸晒方式进行干燥。
2方法与结果
2.1 色谱条件
色谱柱为Thermo Syncronis C18柱（4.6 mm×250 mm,5 μm）；流动相： A相为甲醇，B相为体积分数0. 1%磷酸水，梯度洗脱程序详见表1.流速为1 ml·min-1;波长为325 nm;柱温为30 ℃；进样量为5 μL.
2.2 溶液制备
2.2.1 对照品溶液的配制
…… 此处隐藏2488字 ……
[1] Ch.P（中国药典）Part 1 [S].2015:310.
[2] Editorial board of the second edition of Nanjing University Of Chinese Medicine. Great Dictionary of traditional Chinese Medicine（中药大辞典）[M] Second edition（2）。 Shanghai: Shanghai Scientific & Technical Publishers. 2006:2901.
[3] Gao JM,Zhang AL,Zhang KJ,et al. Advances in the Researches of Distribution, Extractionand Bioactivities of Chlorogenic Acids [J] . J Northwest Forestry Univ（西北林学院学报）， 1999, 14 （ 2） : 73-82.
[4] HANG An-ling, MA Qiong, GAO Jin-ming ,et al. Studies on bioactivities of chlorogenic acid and its analogues [J] . Chin Tradit Herb Drugs（中草药），2001,32（2）：173-176.
[5] Ma YH,Wang XQ,Hou FF,et al.Rapid resolution liquid chromatography （RRLC） analysis and studies on the stability of Shuang-Huang-Lian preparations[J].J Pharm Biomed Anal,2011,54（ 2） : 265-272.
[6] Makiko T,Kazuko N,Seiichiro I,et al. Changes in caffeic acid derivatives in sweet potato （ Ipomoea batatas L.） during cooking and processing[J].J Pharm Biomed Anal,2006,70（ 1） : 172-177.
[7] Gu Lihong, Zhu Pinye.Influence of Light and Temperature on the Stabilityof the Solution of Chlorogenic Acid[J].Chin Tradit Pat Med（中成药），1999,21（ 11） : 568-569.