依达拉奉研制工作综述
依达拉奉是日本日本三菱东京制药株式会社研制开发的新型脑保护剂，2001年4月经后生省批准在日本上市，现未列入任一国药典, 按《新药研究审批办法及有关规定》本品列为新药二类（化学药品）。按照我国《新药审批办法》的有关规定，完成以下研究工作： 2.1、原料药合成：
将苯肼与乙酰乙酸乙酯在乙醇中回流制得1-苯基3-甲基-2-吡唑啉-5-酮，收率49%。 2.2、结构确证：
结构确证经元素分析、红外、紫外、核磁碳谱、核磁氢谱、质谱、X-光衍射和差热分析，证明合成样品结构与依达拉奉结构一致。
2.3、理化常数、纯度检查、含量测定的研究及质量标准的制订：
对三批样品进行理化性质的研究，如外观性状、色，嗅、味、溶解度、熔点、摩尔吸光系数等。
对本品的鉴别采用了紫外鉴别法、化学法和红外光谱法。
本品的纯度检查考察了乙醇溶液的澄清度与颜色、有关物质、硫酸盐、氯化物、干燥失重、炽灼残渣、重金属、砷盐等。
含量测定采用了非水滴定法，经研究此方法测定含量精密度好，本品含量均大于99.0%。
根据理化常数、纯度检查、含量测定的研究结果制定了质量标准。 2.4、稳定性研究
本品经影响因素试验表明：本品对光照、高温、高湿等条件，除光照条件下性状微有变黄外，各项指标无变化；加速试验六个月，各项指标均无变化。长期留样考察六个月，各项指标无变化。因此本品应遮光保存。 2.5、主要药效学研究
依达拉奉为强效自由基清除剂，可抑制脑组织缺血-再灌注引起的大量自由基和脂质过氧化物的产生，从而保护脑组织，减轻脑神经症状，促进神经功能恢复。药效研究文献资料表明：本品能抑制谷氨酸对神经细胞的损伤作用，大鼠全
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脑缺血动物模型、大鼠半脑缺血动物模型以及临床脑梗塞病例研究结果表明，依达拉奉静脉注射给药后能抑制脑缺血所致的神经细胞损害以及抑制脑水肿和脑梗塞进展过程，临床试验显示依达拉奉能抑制梗塞周边血流量的下降，保护梗塞区脑组织。
2.6、药理、毒理研究 2.6.1. 一般药理试验：
依达拉奉10 mg/kg低剂量组静脉给药后对小鼠和大鼠的一般症状均无影响，30 mg/kg以上剂量组可见眼睑下垂，流泪，流涕，活动低下症状。
对中枢神经系统的影响：10 mg/kg以上剂量组可见醋酸扭体试验的抑制反应，30 mg/kg以上剂量组可见自发活动低下，100 mg/kg剂量组可见体温低下，此外，未见其他的影响。依达拉奉在受试剂量范围内对躯体神经系统，自主神经系统和平滑肌均无影响。
对呼吸和循环系统的影响：30 mg/kg以上剂量组可见一过性低血压反应，伴随反射性心率和左心室内最大变化率增加。
对消化系统的影响：30 mg/kg以上剂量组可见肠管运动抑制反应。
对其他系统影响：对水及电解质代谢的影响，100 mg/kg剂量组可见电解质排泄量增加。依达拉奉对血液凝固及血小板凝集功能无影响，100 mg/kg剂量组空腹血糖增加。 2.6.2.动物急性毒性试验:
小鼠的急性毒性试验:依达拉奉口服给药的LD50值为2550 mg/ kg。依达拉奉静脉注射给药，的LD50值为676.9mg/kg。 2.6.3.动物长期毒性试验
I、大鼠26周重复静脉给药毒性试验和5周恢复期试验
大鼠26周重复静脉给予依达拉奉10、30、100和300mg/kg，结果显示： 30mg/kg及以上剂量组给药后可见瞬目，眯眼，流泪，头部震动,洗面动作等一过性症状，并且还可见体重增幅下降，摄食量减少。100mg/kg剂量组可见自发运动减少以及步态蹒跚等一过性症状。
与对照组相比，30mg/kg及以上剂量组尿液中酮体、胆红素及尿胆素原阳性率增加，肝脏重量下降，100mg/kg剂量组可见血浆凝血素时间延长，ALP为高值。
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血清中总蛋白、游离脂肪酸和磷脂为低值。
上述各变化在恢复期有逆转倾向。
大鼠26周重复静脉给药的无毒剂量为10mg/kg。 II、比格犬26周重复静脉给药毒性试验和5周恢复期试验
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比格犬26周重复静脉给予依达拉奉10、30和100mg/kg，结果显示：100mg/k剂量组给药后可见镇静，步态失调，缩瞳，行走蹒跚，嗜睡以及流涎等一过性症状，并且还可见体重增幅下降和贫血改变。
与对照组相比，肾脏与体重的比值增高，并可见肾小管上皮色素颗粒沉着。 上述各变化在恢复期有逆转倾向。
比格犬26周重复静脉给药的无毒剂量为30mg/kg。 2.6.4.致突变试验
依达拉奉回复突变试验、染色体畸变试验和微核试验均为阴性反应，显示依达拉奉无明显致突变毒性。 2.6.5.生殖毒性试验
依大拉奉对大鼠亲代动物一般毒理学的无毒剂量为300mg/kg，对生殖功能无影响的剂量为300mg/kg，对其下一代无影响的剂量为30mg/kg。依大拉奉对家兔亲代雌性动物及其其下一代无影响的剂量为20mg/kg。 2.7、药代动力学
健康成年男子和65岁以上健康老年龄依达拉奉0.5mg/kg/30min，2次/日，共2日反复静脉给药后，血浆原形药物浓度的变化与初次用药变化相同，终末消除半衰期（t1/2β）分别为2.27±0.80hr和1.84±0.17hr，Cmax分别为888±171ng/ml和1041±106ng/ml。依达拉奉静脉给药后，血浆中的主要代谢物为依达拉奉硫酸和葡萄糖醛酸结合物。依达拉奉主要以尿液为排泄途径，每次给药后12hr，代谢物依达拉奉硫酸和葡萄糖醛酸结合产物尿中排除率占口服剂量的71.0-79.9%，原形药物为0.7-0.9%。依达拉奉（5和10μM）体外与人血清蛋白和人血清白蛋白结合率分别为92%和89-91%。健康老年龄依达拉奉的药代动力学参数与健康成年男子差异无显著性。反复给药后未见药物在体内的蓄积性。
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