1、Each allele has a different phenotype ,why(illustrate by example).

位于染色体同一位置的分别控制两种不同性状的基因是等位基因，等位基因之间具有多种关系。比如，果蝇中white位点的存在对红眼的形成是必要的。这个位点是根据无义突变命名的，该突变使果蝇在突变杂合子中具有白色的眼睛。表述野生型和突变型基因时，通常在野生型基因后面加上＋。

当等位基因存在时，一个动物可能是携带两种突变基因的杂合子。这种杂合子的表型依赖于每一个突变所遗留下的活性。从本质上讲，两个突变基因间的关系与野生型和突变型间没有区别，一个突变可能都是显性的，也可能部分是显性的。在任何一个遗传位点上并非一定要有一个野生型基因。人类学行系统的比较就提供了一个例子：缺失功能有空白型表示，即O型；但是功能性的A型和B型是共显性的，并且对O型表现出显性。

2、Conservation of exons and its application.

外显子的保守性可以做为鉴定编码区的基础，即通过确认那些在许多生物体中都存在的序列片段。对于含有这样基因的区域，即在许多生物中这些基因的功能长期被保留下来，这个序列所代表的蛋白质应当有两个特性：它必须有一个开放的阅读框（ORF）；在其它生物中很可能存在与它相关的序列。

物种杂交可作为鉴定基因的第一条标准，将来自一定区域的短片段作为探针，通过Southern杂交检测来自不同物种的相关DNA，如果我们发现几个物种中的杂交片段与某一探针相关（探针通常来源于人的DNA），则这个探针就可成为一条基因外显子的候补片段。将这些候补片段进行测序，如果它们有阅读框，则它们就可被用来分离周围的基因组区域；如果它们是一个外显子的一部分，则可以用它来鉴定整条基因，分离相应的cDNA和mRNA,从而最终分离出蛋白质。

3、Chromosome walking and its application.

从第一个重组克隆插入片段的一端分离出一个片段作为探针从文库中筛选第二个重组克隆，该克隆插入片段含有与探针重叠的顺序和染色体的其它顺序。从第二个重组克隆的插入片段再分离出末端小片段筛选第三个重组克隆，如此重复，得到一个相邻片段，等于在染色体上移了一步，称为染色体步移。

染色体步移技术是一种重要的分子生物学研究技术，使用这种技术可以有效

地获取与已知序列相邻的未知序列，即侧翼序列。主要应用有：

（1）根据已知基因或分子标记连续步移，获取人、动物和植物的重要调控基因，可用于研究结构基因的表达调控；

（2）步查获取新物种中基因的非保守区域，从而获得完整的基因序列； （3）鉴定T-DNA或转座子的插入位点；

（4）用于染色体测序工作中的空隙填补，获得完整的基因组序列； （5）用于人工染色体PAC、YAC和BAC的片段搭接。

4、How to clone gene for genome?

（1）应用λ噬菌体载体构建基因组文库

构建基因组文库的第一步是从给体生物制备基因组DNA，并用限制酶消化法产生出适于克隆的DNA片段。然后在体外将这些DNA片段同适当的λ噬菌体连接成重组体分子，并转化到大肠杆菌的受体细胞中去。最后从转化子克隆群体中挑选出含有目的基因的克隆。 （2）应用柯斯质粒载体构建基因组文库

为了使真核基因组DNA克隆的柯斯质粒载体上，需用核酸内切限制酶Sau3A局部消化基因组DNA。然后分离收集分子量为35-45kb的片段群体，并同线性化处理的柯斯质粒载体DNA连接重组。经体外包装之后，感染大肠杆菌寄主细胞。在细胞内柯斯质粒载体按质粒特性进行复制扩增，形成基因组文库。

5、利用cDNA克隆某基因（举例）

cDNA克隆的基本过程是通过一系列的酶促作用，使总poly（A）mRNA转变成双链cDNA群体，并插入到适当的载体分子上，然后再转化到大肠杆菌寄主菌株的细胞内，如此便构成了包含着所有基因编码序列的cDNA基因文库，主要步骤如下：

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DNA指纹分析技术，即使用限制性内切酶切割每个个体的、含有短重复序列的区域后所产生的片段，通过分析这些片段的异同而得到个体间的遗传关系。因为这些片段对于每个个体都是唯一的，任何两个个体之间所存在的这样的特殊片段可以用来定义它们之间的遗传关系，如父子之间的遗传关系。

16、The “adaper” is transfer RNA, why?

mRNA 中的每个核苷酸三联体代表一个氨基酸。由于核苷酸三联体与氨基酸的结构不同，“适配器”使每个三联体密码子是与特定的氨基酸相对应的。其中的“适配器”是tRNA, 它有两个关键性质：1.它代表唯一的氨基酸，并与其共价相连；2.它包含了一个三核苷酸序列，即反密码子，它与代表氨基酸的密码子是互补的。反密码子使tRNA 能够通过碱基互补配对原则识别密码子。

17、比较三种RNA的结构及功能

种类 mRNA tRNA rRNA

结构 功能 由氨基酸编码区和非编码区组成，真核生物mRNA 合成蛋白质含有5 ’末端帽子结构和3’末端的多聚A尾结构。的模板 原核生物mRNA起始密码子上游存在SD序列 由74 - 95个碱基组成，形成带有4 个恒定臂的三转运氨基酸 叶草二级结构（在更长的tRNA 中另有一个侧臂） 主要的rRNA具有广泛的二级结构并且和蛋白质结核糖体的组合形成核糖体，长度介于1500-1900或者成部分 2900-4700个碱基之间 18、How to produce the cap and the poly(A) for eukaryotic mRNA?

第一种甲基化发生在所有真核生物中，即在端部鸟嘌呤的第7位上加上一个甲基，仅仅拥有这样单一甲基的帽子0（cap0）。即使在单细胞真核生物中也发