·1120·

CHINESEJOURNALOFINTEGRATIVEMEDICINEONCARDIO/CEREBROVASCULARDISEASE Setember 2014 Vol.12 No.9p

P13KAkt信号通路在七氟醚预处理

减轻大鼠脑缺血再灌注损伤中的作用

杨华丽,韩冲芳,周晓辉,雒 珉,王晓鹏,张建文,张卫卫

)1

)目的 研究磷脂酰肌醇3激酶丝氨酸/苏氨酸激酶(信号通路在七氟醚预处理减轻大鼠脑缺血再灌注损伤 摘要:P13KAkt

:、、中的作用。方法 雄性成年S按随机法分为5组(假手术组(缺血再灌注组(七氟醚预处理组(D大鼠40只,n=8)C组)IR组)S注2光镜下观察各组的病理学变化,免疫组化法检测磷酸化的A4h后取大鼠海马组织,kt表达,TUNEL法计算细胞凋亡指数

()。,,结果 与C组相比,其余4组A指标表达均增加(与IAII、ktP<0.05)R组相比,S组AI表达降低显著(P<0.05)pA脑缺血再灌注;七氟醚预处理;磷脂酰肌醇3激酶;蛋白质丝/苏氨酸激酶 关键词:

、。采用夹闭双侧颈总动脉法制备脑缺血再灌注模型,组)七氟醚预处理+抑制剂L和溶剂组(灌Y294002组(S+LY组)DMSO组)

),kt表达明显增加(P<0.05S+LY组及DMSO组AI和PAkt表达差异无统计学意义。结论 七氟烷预处理可能通过激活pA

/减轻大鼠脑缺血再灌注损伤。PI3KAkt信号通路,

:/()doi 中图分类号:R743R285.5 文献标识码:A 10.3969.issn.16721349.2014.09.045 文章编号:16721349201409112002j

脑缺血再灌注损伤可引起脑细胞凋亡。苏氨酸激酶/磷脂

)酰肌醇3激酶丝氨酸(是参与细胞增殖分化、抑P13KAkt

1]

。研究表制细胞凋亡,是细胞生存的一种重要信号通路之一[

检测pAkt的活性(kt多克隆抗体购于北京博奥森生物pA

。光镜下pA技术有限公司)每张切kt阳性胞浆呈现黄棕色,,值)作为评价阳性产物指标。

检测程序1.5 细胞凋亡的检测 TUNEL法检测脑细胞凋亡,

按照TUN北京中杉金桥生物技术有限公司)说明书EL试剂盒(进行。随机选取5个视野,计算阳性细胞数占总细胞数的百分,比(阳性细胞细胞核呈现棕色颗粒)所得指数即为凋亡指数()。AI

明,七氟烷预处理对脑缺血再灌注损伤具有保护作用,而这种保。本实验研究P13KAkt信号通路来

评价七氟烷预处理对大鼠脑缺血再灌注损伤中的保护作用。护机制尚不完全明确1 材料与方法

[2,3]

片随机选取5个视野,用图像分析系统计算平均光密度值(OD

体重21.1 实验动物及分组 成年雄性SD大鼠40只,20g~

(,山西医科大学动物实验中心提供)按随机数字法,随机280g):、、分为5组(假手术组(缺血再灌注组(七氟n=8C组)IR组)、。组)溶剂组(DMSO组)

、烷预处理组(七氟烷预处理+抑制剂LS组)Y294002(S+LY1.2 模型制备及分组处理 采用夹闭双侧颈总动脉法制备脑缺血再灌注模型。大鼠称重,腹腔注射1经0%水合氯醛麻醉,

实验数据采1.6 统计学处理 用统计学SPSS17.0软件分析,

)用均数±标准差(表示,组间行单因素方差分析,两两之间x±s2 结 果

采用SNK法,P<0.05为差异有统计学意义。

口气管插管,接A上海奥尔特生物科LCV8小型动物呼吸机(

/,技有限公司)行机械通气,潮气量为(频率为65~7)mLk0g

,/,次/吸纯氧,流量为2L吸呼比1∶2。大鼠仰卧固定,minmin颈前正中切开逐层分离,暴露双侧颈总动脉,然后用无创微动脉搏动恢复为建模成功。C组只分离双侧颈总动脉;IR组夹闭双组在缺血前6吸0min分别经七氟烷挥发罐(Aeommedv3000)p,夹夹闭双侧颈总动脉2松开动脉夹后恢复脑血流灌注,0min,;侧颈总动脉缺血2再灌注20min4hS组、S+LY组、DMSO

2.1 大鼠脑细胞凋亡指数 AI及海马组织PAkt表达 与

…… 此处隐藏467字 ……

DMSO组38.461±2.7030.280±0.033

)P<0.与I与S组 与C组比较,105;R组比较,2)P<0.05;

1.4 磷酸化Akt(kt)的检测 采用免疫组化法pA

(试剂购于北京中杉金桥生物技术有限公司)PV6001二步法,

)为山西省卫生厅科研基金课题() 1No.201201045

组病理学变化。

)P<0.比较,305。

形态2.2 各组海马组织光镜观察 C组神经元细胞分布均匀,