LC-2010AHT型高效液相色谱仪操作规程

时间:2022-11-20 19:26:44 作者:壹号 字数:5859字

岛津LC-2010AHT型高效液相色谱仪操作规程

目 的:规范岛津LC-2010AHT型高效液相色谱仪的使用。 范 围:本规程适用于LC-2010AHT型高效液相色谱仪操作。 所属部门:***。 责 任 人:***。 内 容:

1 系统组成

本系统由容器箱(放置储液瓶)、 自动进样器、检测部、输液部、柱温箱、系统控制器、岛津液相色谱工作站(LCsolution工作站)、稳压器和电脑等组成。 2 准备

2.1 准备所需的流动相,用合适的0.45μm滤膜过滤,超声脱气至少5min。

2.2 根据待检样品的需要更换合适的洗脱柱(注意方向)。

2.3 配制样品和标准溶液(也可在平衡系统时配制),用0.45μm滤膜过滤。

2.4 检查仪器各部件的电源线、数据线和输液管道是否连接正常。 3 开机

3. 1 接通电源,打开稳压器,按下系统控制器面板上的电源开关【on/off】,并同时打开与高效液相色谱仪连接的电脑。

3.2 待高效液相色谱仪自检完毕后,上托画面上显示要输入Login Pass-ID-No的对话框,输入00000后,按 [OK] 显示Menu画面,在按F5进入主菜单。双击桌面上【Lcsolution】,再点击对话框中的分析【仪器 1】,即打开在线分析。

3.3 色谱方法的建立 在“在线分析”界面左上角文件项下点击新建方法文件,点击画面【高级】,在此项下进行参数设定:

3.3.1 在【数据采集】处设置【采集时间】、【泵】处设置流速【Flow】和通道的选择并输入各通道的浓度【即A 、B、C、D 四个通道的比例】及【最大压力】一般25Mpa。并可根据检测方法在【时间程序】项下设置梯

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度程序(具体操作详见LC-2010AHT操作说明书之梯度洗脱的设定) 3.3.2【检测器】项下的【D2】处选择开或关【OFF/D2】;【波长选择】处设置检测波长;其他参数为系统默认。

3.3.3【柱温箱】项下的【使用柱温箱】除打“√”,并根据方法设置具体温度(一般C18色谱柱柱温不宜超过40℃)。

3.3.4 【自动进样器】各参数为出厂前所设置的固定参数。可以不用设置。 3.3.5 【自动排气】项下选择所需要排气的通道 A 、B 、C 、D及排气时间。所以参数设置完成后点击【下载】,弹出是否保存当前方法的对话框,点击“是”即将方法存入电脑(一般根据样品名称来命名方法文件)。(备注:在使用中泵通道时,如不设置,系统默认为A –通道)。 4.数据采集

方法建立完成后,用所需的流动相来平衡色谱柱(若流动相中有缓冲盐,用前需先用90%的水甲醇过柱30min,方可让流动相进入色谱柱)。 待系统平衡好后,即可进行数据采集。 4.1 单次运行

4.1.1待系统平衡好后,点击“在线分析”界面左侧“单次运行”,设置数据存入路径、样品名称及进样量,点击“确定“,即开始数据采集。 4.1.2 数据采集完成后,打开“再解析”LCsolution工作站,进行数据处理。(具体详见LC-2010AHT数据处理说明书) 4.2 批处理

4.2.1 在系统平衡时,点击“在线分析”界面左侧【批处理】,在主菜单“文件”项下选择“新建批处理文件”,再点击【向导】,设置【方法文件】,选择瓶号、盘号及进样量,依次向下设置数据路径后,即得批处理文件。(批处理设置详见LC-2010AHT仪器操作说明书)

4.2.2.待系统平衡好后,点击【批处理开始】运行批处理,即开始数据采集。(进行批处理采集时,可以在数据采集最后设置冲柱采集,并设置关机程序)。

4.2.3 数据采集完成后,打开“再解析”LCsolution工作站,进行数据处理。(具体详见LC-2010AHT数据处理说明书)

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5 仪器的清洁

5.1分析完毕之后,先关闭检测器,继续以工作流动相冲洗30分钟后(如流动相含缓冲盐或酸或碱,换为不含缓冲盐或酸或碱的同比例流动相在冲洗30分钟),再换用水-甲醇(90:10)冲洗系统及色谱柱至少60分钟[必要时再走40min的梯度(水冲90%冲到0)],最后用甲醇或乙腈冲洗至少30分钟。(若为纯水色谱柱开始清洗色谱柱柱时可用100%水进行清洗,有机溶剂尽量用甲醇,一般冲洗色谱柱是泵流速为1.0ml/min)

5.2 冲洗完毕后,将整个流路都置于有机溶剂中,再逐步降低流速至0,关闭电源开关,关闭稳压器。 6 仪器的维护与保养

6.1 靠仪器吃饭的人必须把仪器的维护作为每天的必修课。

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6.2如果流动相中含盐类,在换流动相前先用90%的水将保存在柱子内的有机溶剂冲洗掉(1.0ml/min,20~30min,此时氘灯先不要打开),再换流动相平衡柱子,以防盐析出将色谱柱堵塞。

6.3 水是导致仪器故障的主要杀手,每天使用时必须先过0.45μm滤膜;流动相亦必须先过0.45μm滤膜方可上机;样品进样前亦要先过0.45μm滤膜,尤其是中药样品。

6.4 每次开启泵时,应逐步升高流速至所需流速;关泵时亦逐步降低流速至0。

6.5每天使用人必须注意系统及色谱柱压力的变化,如出现异常,先与工程师联系,查看仪器说明书,再找出故障原因,在工程师的指导下排除故障。(没有工程师的在场时,不能随便修理仪器,尤其是精密部件不能顺便拆除)

6.6 当系统从反相变为正相时,必须用异丙醇将系统及管路中的水冲洗干净,反之亦然。

6.7 使用完仪器后必须作好使用登记,内容包括使用日期,检品名称,色谱柱,流动相,柱压,使用小时数,氘灯使用时间及如何冲洗色谱柱等。以便下次的使用。

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