胶体金免疫层析法检测

玉米中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的研究

刘　波　江晓娣　黄慧艳

（）武汉市粮油食品中心检验站　４３００２１

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摘　要　采用乙酸乙酯提取法对玉米样品前处理，然后用胶体金免疫层析法检测其中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的含量。该法简便快捷，与ＨＰ因此采ＬＣ国家标准法相比检测结果一致，用此法可加强粮食的卫生监管。

关键词　玉米　脱氧雪腐镰刀菌烯醇　胶体金

ＯＮ是最常见的一种污　　脱氧雪腐镰刀菌烯醇Ｄ

染粮食、饲料和食品的霉菌毒素之一，严重影响人和牲畜的健康。它主要是由链孢霉属真菌在缺乏营养

１］

，物质时产生的次级代谢产物［其结构为雪腐镰刀

由于其使用的方便疫层析法是免疫层析法的一种，

快捷性，检测的准确性愈来愈受到人们的重视；该法滴加提取液到检的原理是通过以胶体金为示踪物，

测孔中，抗原抗体反应生成不同深浅的颜色来判定样品中ＤＯＮ的含量。胶体金免疫层析法操作简检测速度快，很适合现场检测，得到了愈来愈多单，的应用。

，菌烯醇（的４－脱氧衍生物，所以命ｎｉｖａｌｅｎｏｌＮＩＶ），名为脱氧雪腐镰刀菌烯醇（４－ｄｅｏｘｒｉｂｏｎｕｃｌｅｎｏｌｙ

［２］

。许多粮谷类都可以受到污染，如小麦、大ＤＯＮ）

麦、燕麦和玉米等。ＤＯＮ对粮谷类的污染状况与产温度、湿度、通风和日照等因素有关。这种毒菌株、

真菌大多在低温、潮湿和收割季节，在谷物中慢慢生长，一般在大麦、小麦、玉米、燕麦中含有较高的浓在黑麦、高粱、大米中的浓度较低，对人和动物可度，

１］

。近年研究发现，以产生广泛的毒性效应［脱氧雪

１　材料与方法

１．１　仪器与试剂

胶体金检测Ｗａｔｅｒｓ２６９５高效液相色谱系统，　／），试剂盒（最低检出限为１高速离心机。０００μｋｇｇ

，，液体）乙酸乙酯（分析纯）甲醇ＤＯＮ标准品（（，，分析纯）乙腈（分析纯）蒸馏水。１．２　方法

１．２．１　高效液相色谱法

／参照国家标准《ＧＢＴ２３５０３－２００９食品中脱　氧雪腐镰刀菌烯醇的测定免疫亲和层析净化高效

［５］

。液相色谱法》

腐镰刀菌烯醇对人和动物的免疫功能产生明显的影响。根据ＤＯＮ的剂量和暴露时间不同可引起免疫抑制或免疫刺激的作用。目前我国谷物中ＤＯＮ

［３］

／的最高值不得超过１０００μｋｇｇ。

当前国家标准中对ＤＯＮ的检测方法主要有酶联免疫吸附法（和免疫亲和层析净化高ＥＬＩＳＡ法）。酶联免疫吸附法是最常效液相色谱法（ＨＰＬＣ法）用的一种不需额外净化，一次性检测大量样品的方法，这种方法的主要缺点是由于存在所用抗体与致使其检出值偏ＤＯＮ的乙酰化类似物的交叉反应，

４］

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。免疫亲和柱净化容易出现假阳性，难以控制［高，

１．２．２　胶体金免疫层析法

１．２．２．１　称取具有代表性的５０ｇ～１００ｇ以上谷

粉碎，过２混匀后称取２．物样品，０目筛，０ｇ试样加入到１５ｍＬ离心管中。再分别加入４．０ｍＬ乙酸乙盖紧盖子后放置于振荡器充分振荡酯和去离子水，

放置于离心机中４５ｍｉｎ，０００ｒｍ，１ｍｉｎ。待液体分ｐ用刻度管量取２．层，０ｍＬ上层清液于８０ｍＬ玻璃烧杯中，用电吹风加热，将上清液吹干。待烧杯冷却

处理的高效液相色谱法（灵敏度高，准确性ＨＰＬＣ）好，得到了广泛的认可，但使用成本昂贵，前处理过程较为繁琐，不利于大规模的推广使用。胶体金免

＊收稿日期：２０１２－０４－２４

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