1．目前市场上果酒、果醋、酸奶和泡菜等越来越受到青睐。请回答下面的问题： （1）传统发酵时发酵液未经过严格的灭菌处理，杂菌却不能正常生长这是由于果酒发酵的___________条件抑制了杂菌生长。与果酒发酵不同，果醋发酵需要在_____________条件下进行。

（2）山楂酒具有活血、补气、健脾等功效，与山楂酒发酵有关的微生物主要是_____________，果酒发酵后是否有酒精产生，可以用_____________来检验，在酸性条件下呈现灰绿色。

（3）在酸奶制作过程中要严格控制发酵条件是保证发酵正常进行的关键通常所指的发酵条件包括___（至少写出两项）。一般情况下含抗生素牛奶不宜制作酸奶，原因是__________________________。

（4）制作泡菜时需要测定亚硝酸盐的含量，其方法是__________________________。

【答案】（1） 无氧、pH呈酸性 供氧充足、温度较高 （2） 酵母菌 重铬酸钾 无菌、密闭（无氧） （3） 抗生素抑制了乳酸菌的生长 （4） 比色法 (3)酸奶制作是利用乳酸菌在无菌条件下进行无氧呼吸制得，所以需要的发酵条件是无菌、无氧等条件才能完成。由于细菌对抗生素（乳酸菌属于细菌）敏感，所以酸奶的制作过程中，不能加入抗生素，否则会抑制发酵菌种——乳酸菌的生长和繁殖。

(4) 制作泡菜时需要测定亚硝酸盐含量的方法是比色法，即先制作含不同亚硝酸盐的比色液，再取腌制了不同时间的泡菜液40mL，加入对氨基苯磺酸溶液和N-1-萘基乙二胺盐酸盐溶液定容至50mL，混匀、静置15min，与标准比色液对比即可。

2．酵母的蛋白质含量可达自身干重的一半，可作为饲料蛋白的来源。有些酵母可以利用工业废甲醇作为碳源进行培养，这样既可减少污染又可降低生产成本。研究人员拟从土壤样品中分离该类酵母，并进行大量培养。下图所示为操作流程，请回答下列问题：

（1）配制培养基时，按照培养基配方准确称量各组分，将其溶解、定容后，调节培养基的 ，及时对培养基进行分装，并进行 灭菌。 （2）取步骤②中不同梯度的稀释液加入标记好的无菌培养皿中，在步骤③中将温度约 （在25 ℃、50 ℃或80 ℃中选择）的培养基倒入培养皿混匀，冷凝后倒置培养。

（3）挑取分离平板中长出的单菌落，按步骤④所示进行划线。下列叙述合理的有 。

a．为保证无菌操作，接种针、接种环使用前都必须灭菌 b．划线时应避免划破培养基表面，以免不能形成正常菌落 c．挑取菌落时，应挑取多个菌落，分别测定酵母细胞中甲醇的含量 d．可以通过逐步提高培养基中甲醇的浓度，获得甲醇高耐受株

（4）步骤⑤中，为使酵母数量迅速增加，培养过程中需保证充足的营养和 供应。为监测酵母的活细胞密度，将发酵液稀释1 000倍后，经等体积台盼蓝染液染色，用25×16型血细胞计数板计数5个中格中的细胞数，理论上 色细胞的个数应不少于 ，才能达到每毫升3×109个活细胞的预期密度。

【答案】（8分）（1）pH 高压蒸汽（湿热）（2）50 ℃（3）a、b、d（4）氧气 无 30

（4）酵母菌通过有氧呼吸大量繁殖，因此为使酵母数量迅速增加，培养过程中需保证充足的营养和氧气供应；台盼蓝是大分子物质，不能将活细胞染色，再根据25×16型的血球计数板：1毫升悬液中待测标本（菌体）总数=80小方格内菌体数/80×400×104×稀释倍数。而台盼蓝与菌液等体积加入，因此要达到每毫升3×109个活细胞的预期密度，理论上无色细胞数应该不少于（3×109）÷（1000×2×104×400÷80）=30个。

3．下图表示花药培养及单倍体育种的大致过程，据图回答下列问题：

(1)过程①是把幼小的花药分离出来，在无菌条件下放在MS培养基上进行培养，配制该培养基时，需要的物质应该有_________________。(至少答三种) (2)过程②是花药在MS培养基所提供的特定条件下脱分化，发生多次细胞分裂，形成____________，此过程进行细胞分裂的方式是____________。

(3)过程③是诱导再分化出芽和根，最后长成植株，长成的植株(不考虑核与核之间融合)是____________植株，其特点是植株弱小，高度不育，生产上无推广应用的价值。若要使其结子结果，可在移栽后在幼苗茎尖滴加适宜浓度的B物质，通常用到的B物质是____________。

【答案】 （1） 水、大量元素、微量元素、蔗糖、琼脂、植物激素、有机物（2） 愈伤组织或胚状体 有丝分裂 （3）单倍体 秋水仙素

…… 此处隐藏615字 ……

（5）橘皮精油的提取方法不采取水中蒸馏法，是因为该方法会导致_______________等问题。

【答案】 （1） 灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌 （2） 醋酸菌 毛霉 （3）用果胶酶处理 （4） 洗涤剂和食盐 （5）原料焦糊和有效成分水解

6．21世纪生物技术企业不断发展壮大，从植物器官提取的各种有效成分越来越得到人民的广泛关注。请结合你所学的知识回答下列有关问题：

（1）菜籽油是用油菜籽榨出来的一种食用油。在利用压榨法提取时，为了提高出油率，需要将油菜籽____________。

（2）利用紫草科植物提取的紫草素呈紫色片状结晶或结晶性粉末，不溶于水，溶于乙醇和植物油。在工业生产中常用____________提取，提取的效率主要取决于____________和____________。

（3）β—胡萝卜素提取后，需要对提取的粗品进行鉴定。下图为β—胡萝卜素的纸层析结果示意图，图中为萃取样品点样点是____________（填“A和D”或“B和C”），图中②代表____________。

（4）玫瑰精油是世界上最昂贵的精油，被称为“精油之后”。水蒸气蒸馏得到油水混合物，加入的NaCl作用是____________，在提取时影响玫瑰精油品质的因素有____________。